来在镜下观察。有时候遇上不同的细胞系,不清楚大概时间的时候,她还可能一分钟、一分半、两分钟…拿
来看好几次,试探最佳消化时间。跟着他,芳华可以尽情地问着所有对实验中不清楚的问题。慢慢地,原来自己东学一
、西摸一
的实验知识逐渐系统起来。很多知其然不知其所以然的地方,都豁然开朗了。他觉得差不多的时候,就从孵箱里拿
培养瓶,对着自然光看一下瓶
。而大多数
瘤细胞都是
贴着培养瓶的内
生长的,在显微镜下看,球形的细胞就因贴
而呈现多角形。这需要实验者注意观察细胞形态了,当本来挨得比较
密的细胞之间
现了细胞间隙,细胞变圆时,就是该终止胰酶消化时间了。芳华白天不在实验室的时候,嘉辉除了帮芳华
预实验、摸索实验条件外,也经常和宋老师等实验员老师以及
实验的几个博士硕士研究生们,讨论着各
实验方法和技术。这让他对国内的研究
平也有了更多的认识。而芳华从嘉辉
上学习到的最重要的一
就是——细节是成败的关键。因为生长满瓶的细胞往往使透明的瓶
上形成雾状,变得半透明。嘉辉
观察就能
觉这半透明的细胞层的厚度,再轻轻摇晃一下瓶中的胰酶消化
,看瓶
细胞层的减少程度,就能判断
消化程度。一般他的判断和显微镜不差什么当他判断消化时间还差
,他就放回孵箱,等一会儿再拿
来就差不多了。
得几次后,他往往时间拿
得更准确了,一次拿
来就是最佳时间。所以,他消化下来的细胞,只需
轻轻
打,就脱落下来,而且损伤极小,当然传代的细胞生长得就好。而“消化”就是用胰酶消化
和细胞作用,使得细胞皱缩变圆,这时候轻摇培养
、或用

取培养
打内
,将细胞洗下来。最后将细胞悬
用

散后分瓶传代。不说他每次在开关超净工作台时的细心,严格
无菌原则
作的严谨,也不说他的动作轻重得当,缓急有别。单是他观察细胞消化的时候,就熟练到了不用显微镜的程度。比如,同样是养细胞,他养的细胞就是比芳华养的
神。在倒置显微镜下看去,它们个个透明光亮,形态饱满。而芳华的细胞虽然是活着的,看生长速度似乎也不差什么,但是在镜下看,细胞质总是有
发暗、培养
中也似乎总有些渣滓似的。最终,还是通过江澜的牵线搭桥,用原来买药的关系和国外药厂联系上了。他们对国内的病例资源也
兴趣,又知
**的实力,很快同意展开合作。芳华一开始纳闷,都是用的一样的培养瓶和培养
,放在同一个37摄氏度恒温的CO2孵箱,同一天传代,同样的换
,为什么自己养的细胞看上去状态就是差一些呢?实质。每个学生都是靠老板的课题经费
实验,所以找个“财大气
的老板”很重要。经费充足,实验相对的就能
得漂亮。嘉辉也观察了芳华的
作后,说她的主要问题还是在传代的时候“消化”这一步骤掌握得不好。这胰酶消化的时间就是关键中的关键了。一般是1到3分钟,这只是大概,不同的细胞系、甚至不同的胰酶在消化的时候,所需的时间都不一。
芳华很佩服,知
他对细节的把握能力,一定也是
了无数实验后才积累起来的。而这回,嘉辉都耐心地教会了芳华。慢慢,芳华养的细胞也同样个个长得“粉
粉
”的了。还有很多其他实验技巧,嘉辉也都手把手教会了芳华。纪主任自然算是财大气
的了,不过手下好几个学生,都是烧钱的主儿。要不是有实验室的依托,也养不起他们。现在又多了芳华这个烧钱的TMZ项目,纪主任最近都在为这件事想办法呢。这段时间,芳华很忙。白天忙着上手术和在病房
置病人,下午和晚上有空就到实验室,跟着嘉辉学习
实验。嘉辉也不光是
实验这一项厉害。他看到实验室的电脑还在用win98系统,就帮着给装上刚
来的win2000系统。电脑或者实验室的某些仪
设备
了问题,他都能大概分析
原因,并动手解决或修理了。药厂以临床疗效观察试验的名义批给了神经外科研究所一批足量的TMZ药
,这下芳华的实验有了切实的保障,而且整个脑外科的医生只要手里有合适病人,都会帮她充实临床病例数。虽然忙,但是每天都过得很充实的。病房有来来去去的病人需要她的帮助、安
,每次在手术台上都有新的
会让她不断积累着、
步着,而从嘉辉那里学习到的东西就更多了。芳华知
这一步的确很关键。消化过度则对细胞的活
损伤较大,消化不足则细胞难于从瓶
上
下,反复
打同样也会损伤细胞活
。所谓传代,是指当细胞在培养瓶中长满了,就把它们稀释后取少量,重新置于新的培养瓶中继续生长。这是保证细胞健康成长和获得大量细胞
行实验的必需步骤。本来,芳华还觉得自己也能比较好地将细胞消化下来。但是,看了嘉辉的
作,芳华才觉得自己
得是差一些。